技術指導當前位置:首頁 ? 技術指導

更多>>

更多>>

更多>>

更多>>

TEMED放一段時間會有沉澱結晶還能用嗎?

關于TEMED 儲存問題,這個產品需要放在陰涼干燥處保存,長期需要惰性氣體中,否則容易氧化產生沉淀,但是產生沉淀并不影響使用。更多>>

在TAE緩沖液中加入RNA酶抑制劑,會不會影響緩沖效果?

TAE buffer 加入 RNA 酶抑制劑,並不會影響緩沖效果,但是影響 RNase inhibitor 本身的效果更多>>

熒光定量PCR為什麼選用白色96孔盤比較好?

一般實驗室都是用透明,建議客戶選白色96孔盤是因為熒光定量PCR的光射反應主要在于貼在96孔板表面上的高透膜好壞會有影響,96孔盤作成白色,可避免光線折射造成數據失真更多>>

SDS PAGE膠一段時間還不凝膠是為什麼?

製作SDS PAGE膠,鑄膠前其中會需要加入APS催化劑,如果長時間不凝膠,可能原因分析APS濃度太低或已經失效,另外還要考慮到溫度條件,若室溫太低也會延緩凝膠的時間更多>>

蛋白電泳的條帶扭曲是為什麼?

一般分析原因是因為鑄膠不良或有氣泡陷入,同時也可能是樣品成分的影響更多>>

DNA樣品上樣到膠孔後會流失到緩衝液中為什麼?

水平電泳槽在製備 DNA or RNA agarose gel, 其實左右邊應該有墊高放「齒梳」的位置,因此齒梳不會太靠近底部,但若是 solution 太熱就放入齒梳,容易碰觸底部,泳道穿孔而造成樣品漏液流失更多>>

孵育時抗體濃度太高會造成條帶反白?

孵育過程使用的抗體如果濃度太高,在凝膠成像前加ECL, 其中有一個受質 H2O2 會被 HRP 的 peroxidase 作用,就是所謂「燒 band」同理是反應太強,因此產生反白現象,增加抗體稀釋倍率即可更多>>

WB實驗壓出了目的蛋白卻沒有內參蛋白為什麼?

最終目的蛋白壓出條帶內參條帶沒有,那就是 anti-Rubisco or anti-actin 抗體使用量的問題或是抗體本身造成的問題更多>>

DNA樣品上樣到Agarose膠孔裡為什麼會出現拉絲擴散?

溶解的瓊脂糖溫度很高的情況下,讓溫度降下來一點點再倒進了模具中,而且沒有完全凝固好不能拔掉梳子,溶解好的瓊脂糖一定要涼涼,如果急用,可以用自來水輔助降溫用手感覺能握住,不燙手,再倒入模具更多>>

分子量為500左右的蛋白,應該用多少的分離膠?其它步驟需不需要特殊處理?

超高分子量的蛋白質分離, 請使用 8 % SDS-PAGE, 然後跑膠的時間要延長。 等待 pre-stained protein marker 70kD 跑到將近底層,小於 70kD的都跑到電泳緩衝液里更多>>

目的蛋白125KDa,使用300mA轉印一小時壓不出條帶,後來轉印三小時,用麗春紅染膜仍然無蛋白?

1. 300 mA 轉膜, 3 小時,絕對不會「所有的」蛋白都「過轉」了。相反的,客戶在 SDS-PAGE 跑膠,上樣品有沒有加入 prestained protein marker, 可以依據這個來判斷有沒有轉膜 或者是過轉! 2. 與其說是「過轉」膜,也有可能是完全沒有將蛋白質..更多>>

蛋白在電泳過程中為什麼蛋白沒辦法濃縮,染色後蛋白條帶也壓不平?

主要原因可能是電泳緩衝液的PH值不正確所造成更多>>

同一片膠上同樣大小的目的蛋白為什麼電泳結束沒有在一條直線上面?

loading buffer 內有一個成份 glycerol 甘油, 用於增加樣品的密度 所以 loading buffer , 加多一點,就會造成下沉更多>>

100bp以下的小分子核酸片段用Agarose跑膠效果不好?

20bp以上100bp以下的小分子核酸片段應該用聚丙烯酰胺凝膠19:1來跑膠才能很好的分離開來條帶更多>>

DNA Marker為什麼出現微笑條帶?

1 電泳緩沖液陳舊。 電泳緩沖液多次使用后,離子濃度降低,ph值上升,緩沖能力減弱,從而影響電泳的效果,建議經常更換電泳緩沖液。2 電泳條件不合適。電泳時電壓不超過20v/cm,溫度應低于30℃。此外,凝膠質量差和凝固不均與都會出現不規則的條帶..更多>>

蛋白電泳跑細胞樣本沒問題,跑小鼠組織樣本曝光後會有一個個小點點?

建議 loading sample, 請客戶務必要先離心 10000 rpm 然後 5 分鐘, 下樣品才不會有沈澱, 所以可以請客戶跑膠后 考馬斯染膠看看。如果染膠條帶正常那就要從后段找原因更多>>

目的蛋白電泳條帶壓不平是為什麼?

同比一片膠上的蛋白marker如果條帶能壓的扁直,那應該是目的蛋白的上樣量太多造成更多>>

凝膠成像曝光圖片出現一片白的曝光不出來是怎么回事呢?

如果白色區域的背景很乾淨,研判是一級抗體根本沒有孵育,因此盛裝抗體的盒子不能偏斜,要保證轉印膜能完全浸泡在孵育液中更多>>

免封閉的Super antibody mate產品能不能適用於Dotblot實驗呢?

mdbio公司免封閉的Super antibody mate專利產品可以適用於Dotblot實驗更多>>

蛋白條帶在電泳過程中越跑越窄是為什麼?

蛋白條帶越跑越窄並非電泳試劑或設備問題,蛋白樣品應該要經過脫鹽處理,可採用過脫鹽柱或透析袋方式更多>>

蛋白上樣緩沖液變性完成固體狀,是什么原因造成?舉例具體使用方法是5X上樣緩沖液加入蛋白樣品中變性8分鐘,比例是5X加入樣品中成1X

一般是雜蛋白質的濃度太高 , 或者是上樣緩衝液體積計算錯誤 , 以案例說明:粗蛋白抽取液體積 80 uL (微升) ,僅需要加入 上樣緩衝液 20 uL (微升),然後加熱 100 C 煮沸 3-5 mins ,即可放置 ice 上,然後離心 10,000 rpm, 3 mins, 取上清液..更多>>

蛋白電泳過程為什麼出現條帶脫尾的情況

往往因為蛋白樣品制備未經過脫鹽處理或者Buffer中的鹽類太多造成,另外也可能因為蛋白loading buffer其中甘油比例不對所導致蛋白樣品的沉降效果不好更多>>

提取試劑盒中離心柱經過高速離心後的篩膜會破裂?

一般試劑盒會隨附產品說明書,過程中利用離心柱離乾目的物都會標明離心的g值與時間,並非rpm,因此如果轉速過高就有可能造成膜的破裂,g值的計算取決於離心機的轉子轉速和旋轉半徑更多>>

為什麼凝膠成像的圖片能看到蛋白Marker的少許條帶?

若是抗體為多株抗體,則會辨認非專一性的蛋白質條帶,包括protein marker上的條帶,這是抗體的專一性不夠,不影響實驗的數據判讀更多>>

為什麼凝膠成像後的目的條帶出現中空泛白?

目的條帶出現中空泛白往往是因為製作轉印前的膠膜三明治有氣泡所導致更多>>

WB實驗中凝膠成像曝光時間一般是多久

凝膠成像曝光時間一般只要1-2秒,曝光時間過長會造成ECL被快速氧化,形成條帶反白或目的蛋白周邊出現白色條帶更多>>

如何使用免封閉的Super antibody mate

不同蛋白表達濃度不一樣,不同廠家抗體稀釋倍數不一樣,因此,第一次使用將先按照原廠抗體公司建議的稀釋倍數進行依抗二抗分別孵育各90分鐘,凝膠成像後如發現抗體和抗原的結合訊躁比太高,即可放大稀釋一抗及二抗倍數,待抓到合適抗體條件後,一抗二抗即..更多>>

Western Blotting 問題診斷及對策

分享鏈接更多>>

實驗室常用試劑、緩沖液的配制方法

1 M Tris-HCl (pH7.4,7.6,8.0) 組份濃度 1 M Tris-HCl 配制量 1L 配制方法 1.稱量121.1 g Tris置于l L燒杯中。 2.加入約800 ml的去離子水,充分攪拌溶解。 3.按下表加入濃HCl量調節所需要..更多>>

蛋白質電泳相關試劑、緩沖液的配制方法

30%(W/V)Acrylamide(聚丙烯酰胺) 組分濃度 30%(W/V)Acrylamide 配制量 1 L 配制方法 (1)稱量下列試劑,置于l L燒杯中。Acrylamide 290 g;BIS 10 g (2)向燒杯中加入約600 ml的去離子水,充分攪拌溶解。 (3)加去離子水將溶..更多>>

核酸電泳相關試劑、緩沖液的配制方法

50× TAE Buffer (pH8.5) 組份濃度 2M Tris-醋酸,100mM EDTA 配制量 1L 配制方法 1. 稱量下列試劑,置于 1 L 燒杯中。 Tris 242 g;Na2EDTA· 2H2O 37.2 g 2.向燒杯中加入約 800 ml 的去離子水,充分攪拌溶解。 3. 加入 57.1 ml 的乙..更多>>

核酸、蛋白質雜交用相關試劑、緩沖液的配制方法

20× SSC 組份濃度 3.0 M NaCl,0.3 M Na3citrate· 2H2O(檸檬酸鈉) 配制量 1L 配制方法 1.稱量下列試劑,置于 l L 燒杯中。 NaCl 175.3 g; Na3citrate· 2H2O 88.2 g 2. 向燒杯中加入約 800 ml 的去離子水,充分攪拌溶解。 3.滴加..更多>>

實驗室常用培養基的配置方法

Ampicillin(氨卡青霉素)(100 mg/ml) 組份濃度 100 mg/ml Ampicillin 配制量 50 ml 配制方法 1. 稱量 5 g Ampicillin 置于 50 ml 離心管中。 2.加入 40 ml 滅菌水,充分混合溶解后,定容至 50 ml。 3. 用 0.22 μm 過濾膜過濾除菌..更多>>

首頁 上一頁 1 下一頁 尾頁
友情鏈接

Copyright 2010 MDBio版權所有
E-mali:[email protected] 地址:山東省青島市嶗山區株洲路120 傳真:0532-88706863

魯公網安備 37021202000795號

时时彩组六全包稳赚